人肝母細胞瘤細胞是來源于肝臟胚胎原基細胞的一類上皮來源的惡性腫瘤細胞,在科研和臨床中具有重要價值。
一、細胞特性
形態特性:人肝母細胞瘤細胞通常呈現上皮樣形態,貼壁生長。
分泌特性:部分細胞系如HuH-6細胞可產球蛋白和甲胎蛋白(AFP),AFP是肝母細胞瘤的重要診斷標志物。
遺傳特性:人肝母細胞瘤細胞的遺傳背景復雜,可能與WT1基因突變、11p15.5染色體區域印記異常等遺傳缺陷密切相關。
二、細胞來源與類型
來源:人肝母細胞瘤細胞主要來源于肝母細胞瘤患者的腫瘤組織。
類型:根據組織學特征,肝母細胞瘤可分為上皮型、混合型兩類。上皮型又細分為胎兒型、胚胎型、粗梁型和小細胞未分化型。不同亞型的細胞在生物學行為、預后和治療反應上可能存在差異。
三、培養條件與方法
培養基:通常使用DMEM或MEM等基礎培養基,添加10%的胎牛血清(FBS)和1%的青霉素-鏈霉素(P/S)作為培養基。
培養條件:氣相條件為空氣95%、CO2 5%,溫度為37℃。
傳代方法:當細胞密度達到80%~90%時,可進行傳代培養。傳代時,需棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1~2次,然后加入消化液(如0.25% Trypsin-0.53mM EDTA)進行消化。消化后,按一定比例將細胞懸液分到新的培養瓶或皿中繼續培養。
凍存與復蘇:細胞凍存時,需將細胞消化后離心棄上清,加入凍存液(如含10% DMSO的血清)進行凍存。復蘇時,需將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,然后加入培養基混合均勻后離心棄上清,再補加培養基后吹勻進行培養。